蛋白質工学研究室wiki内検索 / 「LBAGプレート作成」で検索した結果
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プロトコル集
プロトコル集 材料・ストック作成 LBAGプレート作成? TAE作成? 20%グルコース? 各種プロトコル 蛋白質発現 コンピテントセル作成? -
培地
培地の組成 LBA寒天培地の作製 SOB液体培地の作製 SOC液体培地の作製 【培地の組成】 LB (ml) 1000ml Tripton-Pepton 10g Yeast Extract 5g NaCl 5g 2N NaOH 500ul YT (ml) 1000ml Tripton-Pepton 8g Yeast Extract 5g NaCl 5g 2N NaOH 500ul 2*YT 1000ml Tripton-Pepton 16g Yeast Extract 10g NaCl 5g 2N NaOH 500ul 寒天培地 1000ml Bacto Agar ... -
コンピテントセル作製
Z-コンピテントセル作製法 Zymo-Reserach社が販売しているコンピテントセル作製キットを用いた作製法。 容易にE.coliのコンピが作製でき、しかも作製されたコンピはインキュベーション時間が2~5分と短時間で、ヒートショック・キュアリング不要。 ただし、キットは高いので節約しましょう。 【参考URL】 http //www.zymoresearch.com/zrc/pdf/T3001i.pdf (Zymo-Reserach)[英語PDF] 〔全体の流れ〕 元菌培養 → コンピテントセル作製 → コンピテンシーチェック 〔ラボデータ〕 コンピ作製データ コメント 元菌培養 【所要時間】 2日 【試薬・器具】 ... -
コロニーPCR
<コロニーPCR> 2×Go taq master mix 全量×1/2 ul プライマー1 ul プライマー2 ul ミリQ ul total コロニー数(+α)×20 ulになるように調製する ↓ 8連チューブに20 ulずつ分注する ↓ LBAプレートを一枚用意する ↓ 前日のプレートから白コロニーを爪楊枝でつつき、Go taq溶液に植える 同時にLBAプレートにも植える(マスタープレートの作製) ↓ プレートは37℃でo/n培養 8連チューブはPCRにかける 条件 94℃ 3 min 94℃ 30 sec 55℃ 30 sec 30サイクル 72℃ min 72℃ 3 mi... -
蛋白質発現
【LB液体培地の作製】 250 ml × 2本 500 ml フラスコ(バッフル付き)に注ぎ、キャップとともにオートクレーブ。 【形質転換】 BL21(DE3)pLysSを氷上に置き溶かす。 ①VH(DiAcSpd)-PhoA/pET、 ②MBP-VL(DiAcSpd)/pETを加え、軽く混合。 On ice for 30 min ヒートショック(42℃、45 sec) 直ちに氷上に戻し、1〜2 min静置。 SOC液体培地を200 ul 加える。 37℃、30 min Curing ①、②、それぞれLBAC寒天培地にプレーティング。 37℃、o/n 【4 ml培養】 それぞれ、LBAC(1% Glucose) 4 mlに植菌 37℃振盪培養、o/n 【250 ml培養】 それぞれ、LBAC 250 mlに植菌 27℃ 振盪培養、数時... -
まとめサイト作成支援ツール
まとめサイト作成支援ツールについて @wikiにはまとめサイト作成を支援するツールがあります。 また、 #matome_list と入力することで、注目の掲示板が一覧表示されます。 利用例)#matome_listと入力すると下記のように表示されます #matome_list -
シーケンス
<シーケンス確認> ★ プラスミドの配列を確認する PCR 1.プラスミド調整 Milli Q 5 μl プラスミド 1 μl(0.2 μgくらい) total 6 μl ※テンプレート量は50~70 fmolが目安。プラスミド量が適性ならばシーケンス解析時の最初のピークが20 min前後で現れる。濃度が濃すぎると30 minくらいになる(らしい)。 2.プレヒート処理(PCR産物で行う際は必要ない) サーマルサイクラー使用 96℃ 1 min 1 cycle 25℃ ∞ でプレヒート。終了後、軽く遠心して水滴を落とす。 3. PCR用サンプル調整(??要確認??) Master mix (on ice) 2μl 5×Sequence buffer 1μl Pri... -
プロトコル
プロトコル集 基本プロトコル プラスミド精製 LB培地(4mL)作製? ミニプレップ? サブクローニング関連 コンピテントセル作製 制限酵素処理? アガロース電気泳動? ライゲーション? トランスフォーメーション? TAクローニング PCR シーケンス コロニーPCR ELISA ELISA? タンパク発現 蛋白質発現 SDS-PAGE? Westernblot? 蛋白研専用プロトコル 名前 コメント -
プラグイン/ニュース
ニュース @wikiのwikiモードでは #news(興味のある単語) と入力することで、あるキーワードに関連するニュース一覧を表示することができます 詳しくはこちらをご覧ください。 =>http //atwiki.jp/guide/17_174_ja.html たとえば、#news(wiki)と入力すると以下のように表示されます。 【カウンターサイド】リセマラ当たりランキング - カウサイ攻略Wiki - Gamerch(ゲーマチ) ウィキペディアを作ったiMacが箱付きで競売に登場。予想落札価格は約96万円!(ギズモード・ジャパン) - Yahoo!ニュース - Yahoo!ニュース 終末のアーカーシャ(終アカ)攻略wiki - Gamerch(ゲーマチ) メトロイド ドレッド攻略Wiki - Gamerch(ゲーマチ) 【まおりゅう】最強パー... -
プラグイン/人気商品一覧
人気商品一覧 @wikiのwikiモードでは #price_list(カテゴリ名) と入力することで、あるカテゴリの売れ筋商品のリストを表示することができます。 カテゴリには以下のキーワードがご利用できます。 キーワード 表示される内容 ps3 PlayStation3 ps2 PlayStation3 psp PSP wii Wii xbox XBOX nds Nintendo DS desctop-pc デスクトップパソコン note-pc ノートパソコン mp3player デジタルオーディオプレイヤー kaden 家電 aircon エアコン camera カメラ game-toy ゲーム・おもちゃ全般 all 指定無し 空白の場合はランダムな商品が表示されます。 ※このプラグインは価格比較サイト@PRICEのデータを利用しています。 ... -
プラグイン/コメント
コメントプラグイン @wikiのwikiモードでは #comment() と入力することでコメントフォームを簡単に作成することができます。 詳しくはこちらをご覧ください。 =>http //atwiki.jp/guide/17_60_ja.html たとえば、#comment() と入力すると以下のように表示されます。 名前 コメント -
抗生物質
【SDS-PAGE】 ガラス器具を扱うときは手袋着用。最初にエタノールでガラス板等を磨く。 アクリルアミドゲル作製(10%) 1枚あたり Lower gel Upper gel 30% アクリルアミド 3.3 ml 450 ul ゲルバッファ 2.5 ml 750 ul milliQ 4.2 ml 1.8 ml 20% APS 50 ul 12.5 ul TEMED 6.5 ul 3.5 ul total 10 ml 3 ml APS、TEMEDは最後に加え、数回上下反転させて穏やかに混合し、型に流し込む。 (Lower gel) イソプロパノールを重層させる。 ... - @wiki全体から「LBAGプレート作成」で調べる