【SDS-PAGE】
ガラス器具を扱うときは手袋着用。最初にエタノールでガラス板等を磨く。
アクリルアミドゲル作製(10%)
1枚あたり Lower gel Upper gel
アクリルアミドゲル作製(10%)
1枚あたり Lower gel Upper gel
30% アクリルアミド 3.3 ml 450 ul ゲルバッファ 2.5 ml 750 ul milliQ 4.2 ml 1.8 ml 20% APS 50 ul 12.5 ul TEMED 6.5 ul 3.5 ul total 10 ml 3 ml
APS、TEMEDは最後に加え、数回上下反転させて穏やかに混合し、型に流し込む。
(Lower gel) イソプロパノールを重層させる。
(Upper gel) コームを差し込んでウェルを作る。
固まったら泳動層を組み立てる。
(Lower gel) イソプロパノールを重層させる。
(Upper gel) コームを差し込んでウェルを作る。
固まったら泳動層を組み立てる。
サンプルバッファ 9 ul メルカプトエタノール 1 ul ×サンプル数(+α) 調製 ・・・① total 10 ul
サンプル 10 ul ① 10 ul 調製 total 20 ul
95℃、5 min、ボイル。
ウェルにアプライして泳動 (マーカーは10 ul)
ウェルにアプライして泳動 (マーカーは10 ul)
ゲルを染色する(Quick CBB+)
milliQ 5 min × 3回
QCBB+ 45〜60 min
milliQ 5 min × 3回
milliQ 5 min × 3回
QCBB+ 45〜60 min
milliQ 5 min × 3回
ゲルを乾燥させる。