「培地」(2011/04/20 (水) 18:03:58) の最新版変更点
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&link_anchor(LB){ 培地の組成}
&link_anchor(LBA){LBA寒天培地の作製}
&link_anchor(SOB){SOB液体培地の作製}
&link_anchor(SOC){SOC液体培地の作製}
&anchor(LB,option=nolink){培地の組成}
***LB (ml) 1000ml
Tripton-Pepton 10g
Yeast Extract 5g
NaCl 5g
2N NaOH 500ul
***YT (ml) 1000ml
Tripton-Pepton 8g
Yeast Extract 5g
NaCl 5g
2N NaOH 500ul
***2*YT 1000ml
Tripton-Pepton 16g
Yeast Extract 10g
NaCl 5g
2N NaOH 500ul
***寒天培地 1000ml
Bacto Agar 15g
***1%Glucose培地 1000ml
2M Glucose 27.8ml
20%Glucose 50ml
&anchor(LBA,option=nolink){【LBA寒天培地プレートの作製】}
★ アンピシリン耐性のLB寒天培地プレートを作製する
Bacto trypton 6 g
Yeast extract 3 g
NaCl 3 g
5N NaOH 120 ul
ミリQで600 mlまでメスアップ(スターラーバー入りの三角フラスコに移す)
↓
Agar Powder 9 gを加える
↓
オートクレーブ
↓
手で触れる温度くらいまで冷ました後Ampicilin(100 mg/ml) 600 ulを加えて撹拌
(グルコースを入れる場合もこのタイミング。通常1%)
↓
プレートにデカントで分注
↓
乾燥するまでベンチ内に静置(クリーンベンチのUVはオフにしておく)
↓
4℃で保存
&anchor(SOB,option=nolink){【SOB液体培地の作製】}
Bacto trypton 1.6 g
Bacto yeast extract 0.4 g
NaCl 0.04 g
250 mM KCl 800 ul
2 N NaOH 40 ul
milliQで80 mlにメスアップし、オートクレーブ。
使用直前に、以下の試薬を無菌的に加える。
1 M MgCl2 800 ul
1 M MgSO4 800 ul
&anchor(SOC,option=nolink){【SOC液体培地の作製】}
培地の調製
Bacto trypton 2 g
Yeast extract 0.5 g
NaCl 0.05 g
5N NaOH 20 ul
ミリQで100 mlまでメスアップ(三角フラスコに移す)
↓
オートクレーブ
↓
手で触れる温度くらいまで冷ました後、以下の試薬を無菌的に加える
1M MgCl2 1 ml
1M MgSO4 1 ml
2M Glucose 1 ml
↓
ベンチ内でエッペンに1 mlずつ分注。-80℃にて保存。
&link_anchor(LB){ 培地の組成}
&link_anchor(LBA){LBA寒天培地の作製}
&link_anchor(SOB){SOB液体培地の作製}
&link_anchor(SOC){SOC液体培地の作製}
&anchor(LB,option=nolink){【培地の組成】}
LB (ml) 1000ml
Tripton-Pepton 10g
Yeast Extract 5g
NaCl 5g
2N NaOH 500ul
YT (ml) 1000ml
Tripton-Pepton 8g
Yeast Extract 5g
NaCl 5g
2N NaOH 500ul
2*YT 1000ml
Tripton-Pepton 16g
Yeast Extract 10g
NaCl 5g
2N NaOH 500ul
寒天培地 1000ml
Bacto Agar 15g
1%Glucose培地 1000ml
2M Glucose 27.8ml
20%Glucose 50ml
&anchor(LBA,option=nolink){【LBA寒天培地プレートの作製】}
★ アンピシリン耐性のLB寒天培地プレートを作製する
Bacto trypton 6 g
Yeast extract 3 g
NaCl 3 g
5N NaOH 120 ul
ミリQで600 mlまでメスアップ(スターラーバー入りの三角フラスコに移す)
↓
Agar Powder 9 gを加える
↓
オートクレーブ
↓
手で触れる温度くらいまで冷ました後Ampicilin(100 mg/ml) 600 ulを加えて撹拌
(グルコースを入れる場合もこのタイミング。通常1%)
↓
プレートにデカントで分注
↓
乾燥するまでベンチ内に静置(クリーンベンチのUVはオフにしておく)
↓
4℃で保存
&anchor(SOB,option=nolink){【SOB液体培地の作製】}
Bacto trypton 1.6 g
Bacto yeast extract 0.4 g
NaCl 0.04 g
250 mM KCl 800 ul
2 N NaOH 40 ul
milliQで80 mlにメスアップし、オートクレーブ。
使用直前に、以下の試薬を無菌的に加える。
1 M MgCl2 800 ul
1 M MgSO4 800 ul
&anchor(SOC,option=nolink){【SOC液体培地の作製】}
培地の調製
Bacto trypton 2 g
Yeast extract 0.5 g
NaCl 0.05 g
5N NaOH 20 ul
ミリQで100 mlまでメスアップ(三角フラスコに移す)
↓
オートクレーブ
↓
手で触れる温度くらいまで冷ました後、以下の試薬を無菌的に加える
1M MgCl2 1 ml
1M MgSO4 1 ml
2M Glucose 1 ml
↓
ベンチ内でエッペンに1 mlずつ分注。-80℃にて保存。
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